1. MDM2 SNP 309 human papillomavirus infection in cervical carcinogenesisBy:OsamuNunobiki Laura Mejía Cardona III Semestre 2010

2. INTRODUCTION Human papillomaviruses (HPVs) may cause warts . (100 )30 types of HPV are associated with cancer (16,18,11,6…). Transition zone selectivity.

3. INTRODUCTION: cervical cancer Thetisuueonthecervixbecomeabnormal. Cellsstarttogrowuncontrollabyforming neoplasias.

4. SYMPTONS Unusual vaginal discharge . Light vaginal bleeding or spots of blood outside of normal menstruation . Pain or vaginal bleeding with sexual intercourse . Post-menopausal vaginal bleeding .

5. Hpv and cancer Displasia precancerouscells CANCER Cervical intraepithelial neoplasia (CIN). NORMAL CERVIX

6. Hpv and cancer CIN I CIN II

7. Hpv and cancer NIC III INVASIVE CERVICAL CANCER

8. microscopy

9. GENERAL OBJECTIVE Is to investigate the biological significance of single nucleotide polymorphism (SNP) at murine double-minute 2 homolog (MDM2) promoter 309 in cervical carcinogenesis.

10. MUESTRAS 195 muestras de frotis cervical. Toma de muestras bastoncillos de algodón Sln salina de tampón fosfato Almacenaron -20c

11. LINEA CELULAR Cultivo de células con un periodo de vida indefinido, pueden ser transformadas genéticamente o derivadas de un tumor.

12. USOS LINEAS CELULARES Mantenimiento y producción de tejidos para transplante. Ingeniería de proteínas Inmunologia Virologia AnalisisDx

13. LINEA CELULAR Análisis genotípico de MDM2-SNP309. Tipificación del virus papiloma humano (50,102,41) 8 líneas de células escamosas (SKG-I, SKG-II, SKG-IIIa, SKG-IIIb, OMC-1, YUMOTO, QG-U and QG-H)

14. Pcr: reacción en cadena de polimerasa Amplificación enzimática: Directa-Indirecta. # copias. Desnaturalización Alineamiento Síntesis Detección, Dx, clonación, etc.

15. Preparación del dna Líneas celulares. Lisis. Buffer (20 mMNaCl, 10 mM Tris-HCl (pH 8,0), 10 mM EDTA (pH 8,0),0,5% SDS y 50 mg / ml de proteinasa K). Extracción del ADN genómico: fenol-cloroformo Precipitado con etanol utilizando técnicas estándar.

16. RESULTADOS Genotipo T / genotipo TG+GG. 41 pacientes (HSIL): riesgo VPH. TT : lineacelular SKG-IIIa. TG o GG: 6 lineas(ex:YUMOTO) (87.5 %): riesgo VPH.

17. RESULTADOS 21 pacientes (HPV16-18): TG+GG , alelo G. 47pacientes tiposdiferentes de HSIL-VPH. OR :TG+GG en los casos de HSIL / controles entre los 68 pacientes con alto riesgo VPH.

18. FIGURA 1 : REPRESENTANTE GENOTIPADO DE MDM2-SNP309 Carriles 1, 5 y 7: TG heterocigotos. Carriles 2, 4 y 6: homocigotos GG. Carril 3:TT homocigota.El tipo salvaje (T)el mutante (G) alelo 121-bp y 168 pb-

19. FIGURA 2: GENOTIPADO DE MDM2-SNP309 EN 8 LÍNEAS DE CUELLO UTERINO CON CARCINOMA DE CÉLULAS ESCAMOSAS El genotipo TT :SKG-IIIa el genotipo de la TG de SKG-I, SKG-II, III b SKG-1-y el MACel genotipo GG de Yumoto, QG QG-U y H

20. DISCUSSION

21. CONCLUsIONS Por la relación del P53 con el MDM2SNP309, este puede ser usado como marcador en la detección precoz del cáncer. Los pacientes que presentan los tipos 16 y 18 desarrollan mas fácilmente el cáncer. Se pueden implementar otras estrategias de tratamiento para los pacientes que padecen VPH, probablemente con la regulación de la sobreexpresión del MDM2.

22. conclusiones Es necesaria la buena educación sexual desde edades tempranas para disminuir las cifras de enfermedades de transmisión sexual. El mal estilo de vida genera sobreexpresión del P53. El VPH aumenta la expresión del MDM2SNP309.

23. BIBLIOGRAPHY MARTINEZ SÁNCHEZ, Lina María. Biología molecular. 5. ed. Medellín: UPB. Fac. de Medicina, 2009.139p-147p, 305p-306p. LODISH, H. Biología celular y molecular. 5 edición. Buenos Aires: Médica Panamericana, 2004.236p-237p. http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/20538323 http://www.hpv-cancer.com/2007/11/imagenes-del-cuello-uterino-cervix.html http://medical-dictionary.thefreedictionary.com/cervical+cancer

25. "El nacimiento y la muerte no son dos estados distintos, sino dos aspectos del mismo estado.“ Mahatma Gandhi